|
NPRA PUSAT KAWALAN KUALITI |
ARAHAN KERJA: IDENTIFIKASI DAN KANDUNGAN DIETHYLENE GLYCOL DAN ETHYLENE GLYCOL DALAM UBAT CECAIR MENGGUNAKAN GCMS | |
| No. Dokumen: PKKK/300/UP/034 | Terbitan / Semakan: 1 / 2 | |
| Tarikh Kuatkuasa: 1 Julai 2026 | Bahagian / Seksyen: SPPK · Unit Penyaringan | |
Prosedur ini menggariskan tatacara untuk pengenalpastian (identifikasi) dan penentuan kandungan secara kuantitatif (assay) bagi sebatian Diethylene Glycol (DEG) dan Ethylene Glycol (EG) dalam sediaan ubat cecair dengan menggunakan kromatografi gas spektrometer jisim (GC-MS).
Prosedur ini digunapakai untuk produk berdaftar dan tidak berdaftar dalam bentuk sediaan cecair / sirap / ampaian (suspension) perubatan yang diterima di Unit Penyaringan.
• DEG: Diethylene Glycol
• EG: Ethylene Glycol
• GC-MS: Gas Chromatography-Mass Spectrometry
• TIC: Total Ion Current
• RTE: RunTime Environment
• SIM: Selected Ion Monitoring
• LOD: Limit of Detection ($2 µg/mL$, bersamaan $0.02% v/v$ dalam sampel)
• LOQ: Limit of Quantitation ($6 µg/mL$, bersamaan $0.06% v/v$ dalam sampel)
• SST: System Suitability Test
• IQC: Internal Quality Control
Tiada carta aliran untuk prosedur ini.
5.1 Ketua Unit / Pegawai Farmasi Bertanggungjawab:
Memastikan prosedur ini diikuti semasa pengendalian ujian.
5.2 Pegawai Farmasi:
a) Menyelia proses analisis oleh Penolong Pegawai Farmasi.
b) Menyemak keputusan pengujian dan mengesahkan laporan analisis.
5.3 Penolong Pegawai Farmasi U7 / U6 & 5.4 Penolong Pegawai Farmasi:
Menjalankan pengujian sampel mengikut prosedur operasi yang ditetapkan.
GCMS Shimadzu QP2010 Ultra / Agilent 7890A-5975C / Agilent 8890-5977B, Turus BP20 (Wax) $30m × 0.25mm × 0.25 µm$, Gas Helium (99.999%), Methanol (HPLC grade), Piawai Rujukan Ethylene Glycol & Diethylene Glycol RS, Kukus ultrasonik, Mikropipet terentukur, Kelalang volumetrik 5 mL & 100 mL, Penuras membran 0.45 µm, Vial amber 2 mL.
6.3.1 Larutan Piawai Kalibrasi (Aras 1 – 5 & LOD):
| Aras | Stok Campuran (µL) | Isipadu Akhir MeOH (mL) | Kepekatan EG (µg/mL) | Kepekatan DEG (µg/mL) |
|---|---|---|---|---|
| 1 (LOQ) | 135 µL | 5.0 mL | 6.01 | 6.04 |
| 2 | 180 µL | 5.0 mL | 8.01 | 8.05 |
| 3 (SST) | 225 µL | 5.0 mL | 10.02 | 10.06 |
| 4 | 270 µL | 5.0 mL | 12.02 | 12.07 |
| 5 | 315 µL | 5.0 mL | 14.02 | 14.09 |
| LOD | 45 µL | 5.0 mL | 2.00 | 2.01 |
6.3.2 Penyediaan Sampel Cecair / Sirap / Ampaian:
- Goncang botol sampel perlahan-lahan untuk sebatikan sampel secara homogen.
- Pipet tepat 1.0 mL sampel dan masukkan kira-kira 50 mL Methanol ke dalam kelalang volumetrik 100 mL (sediakan duplikasi: Replicates A dan B).
- Sonikasi larutan selama 5 minit dalam kukus ultrasonik.
- Sejukkan larutan ke suhu bilik dan genapkan ke tanda senggatan 100.0 mL dengan Methanol.
- Turas larutan menggunakan penuras 0.45 µm ke dalam vial amber 2 mL.
6.3.3 Sample Dilution: Lakukan pencairan jika kepekatan sampel melebihi julat linear keluk kalibrasi.
| Turus (Column) | BP20 (Wax), 30 m × 0.25 mm × 0.25 µm |
| Kadar Aliran & Gas | Helium (99.999%), 0.65 mL/min (Linear Velocity: 30.0 cm/sec) |
| Mod & Suhu Suntikan | Split (20:1) @ 250 °C, Isipadu: 1.0 µL |
| Suhu Sumber & Antaramuka MS | EI Source: 230 °C, Interface: 240 °C, Tenaga EI: 70 eV |
| Solvent Delay | Scan off: 0.00 hingga 4.00 minit (elak puncak Methanol) |
Jadual Program Suhu Oven (Table 3):
| Ramp | Kadar (°C/min) | Suhu Akhir (°C) | Masa Tahanan (min) | Jumlah Masa (min) |
|---|---|---|---|---|
| Initial | - | 100 °C | 1.00 min | - |
| Ramp 1 | 10.0 °C/min | 130 °C | 7.00 min | - |
| Ramp 2 | 20.0 °C/min | 240 °C | 3.00 min | - |
| Post run | 20.0 °C/min | 250 °C | 3.00 min | 23.0 min |
Mod SIM (Selected Ion Monitoring, Table 4):
| Sebatian | Tetingkap Masa (min) | SIM Ions | ID / Peranan |
|---|---|---|---|
| Ethylene glycol (EG) | 4.50 – 11.00 min | 1. Target: m/z 31 | Kuantitasi (Quantitation) |
| 2. Ref 1: m/z 33 · Ref 2: m/z 62 | Kualifikasi (Qualification) | ||
| Diethylene glycol (DEG) | 11.00 – 20.00 min | 1. Target: m/z 45 | Kuantitasi (Quantitation) |
| 2. Ref 1: m/z 75 · Ref 2: m/z 31 | Kualifikasi (Qualification) |
1. Blank (MeOH) ➔ 2–7. SST Level 3 (6x) ➔ 8. LOD ➔ 9–13. Kalibrasi Level 1–5 ➔ 14. Blank ➔ 15–16. Sampel 1 (A & B) ➔ 17. Blank ➔ 18–29. Sampel 2 hingga 5 ➔ 30. LOD (IQC Bracket) ➔ 31. Blank ➔ 32–33. Sampel 6 (A & B) ➔ Akhir. LOD.
| Parameter | Kriteria Penerimaan |
|---|---|
| Faktor Pengekoran (Tailing factor, Tf) | Tidak Melebihi (NMT) 2.5 |
| Plat Teori (Theoretical plates, N) | Tidak Kurang (NLT) 2000 |
| % RSD keluasan puncak bagi 6 suntikan piawai Aras 3 | Tidak Melebihi (NMT) 10.0 % |
| Nisbah S/N larutan LOD (2 µg/mL) | Tidak Kurang (NLT) 3 |
| Nisbah S/N larutan LOQ (6 µg/mL) | Tidak Kurang (NLT) 10 |
| Kelinearan Keluk Kalibrasi ($R^2$) | R² ≥ 0.9950 |
| IQC: Perbezaan % Waktu Penahanan LOD setiap 5 sampel | Tidak Melebihi (NMT) 3.0 % |
A. Toleransi Nisbah Ion Kualifikasi (Table 6):
| Intensiti Ion Relatif (% Base Peak) | Toleransi Dibenarkan (%) |
|---|---|
| > 50 % | ± 10 % |
| 20 – 50 % | ± 15 % |
| 10 – 20 % | ± 20 % |
| < 10 % | ± 50 % |
B. Pelaporan Keputusan & Had Sempadan (Borderline):
- NOT DETECTED: Dilaporkan jika keluasan puncak < LOD 2 µg/mL (< 0.02% v/v).
- BELOW QUANTITATION LIMIT: Dilaporkan jika keluasan ≥ LOD tetapi < LOQ 6 µg/mL (< 0.06% v/v).
- Borderline LOD: Jika satu replikat < LOD dan satu ≥ LOD, gunakan purata replikat.
- Borderline LOQ: Jika satu < LOQ dan satu ≥ LOQ, jalankan ujian ulangan dengan bahagian sampel baharu bersama keluk kalibrasi.
C. Formula Pengiraan Kandungan (% v/v):
*Ketumpatan: EG = 1.113 g/mL · DEG = 1.118 g/mL.
• Had Kawalan Ethylene Glycol dalam sirap perubatan: Tidak Lebih Daripada (NMT) 0.10% v/v.
• Had Kawalan Diethylene Glycol dalam sirap perubatan: Tidak Lebih Daripada (NMT) 0.10% v/v.
| No. Borang | Tajuk Rekod Kualiti | Lokasi Fail | Tempoh Simpanan |
|---|---|---|---|
| UP/001A | Borang Persampelan | Fail Rekod Makmal | 6 Tahun |
| UP/009 | Laporan Pengujian Identifikasi dan Kandungan DEG dan EG Menggunakan GCMS | Fail Pengujian Produk | 6 Tahun |
- PKKK/300/UP/001: Proses persampelan (Ujian Penyaringan)
- PKKK/300/UP/010: Gas Chromatography Mass Spectrometer Shimadzu (QP2010 Ultra)
- PKKK/300/UP/004: Gas Chromatography-Mass Spectroscopy Agilent (7890A/5975C)
- PKKK/300/UP/017: Gas Chromatography Mass Spectroscopy Agilent (8890/5977B)
- USP-NF Propylene Glycol Monograph: USP 43 – NF 38, year 2020, page 3753.