🇲🇾 NPRA — Pusat Kawalan Kualiti · ISO/IEC 17025 Accredited

◈ Seksyen Pengujian Produk & Kosmetik · Unit Penyaringan

PKKK/300/UP/003 RRLC HP1200

Arahan Kerja Rasmi (Level 300 SOP) · Kategori: HPLC / LC
1
1. Reagen & Piawai
Penyediaan fasa bergerak, stok & kalibrasi
2
2. Pengekstrakan
Timbang, sonikasi, sentrifug & turas 0.45µm
3
3. Persediaan Alat
Purging saluran, autotune & baseline
4
4. Suntikan Batch
Blank, SST (n=6), Sampel & IQC
5
5. Verifikasi & Rekod
Padanan RT, spektrum UV/MS & Laporan
Spesifikasi & Parameter Kromatografi / Analitikal (Official Parameters):
Instrumen UtamaAgilent 1200 Series RRLC (Binary Pump, DAD)
Turus / ColumnZorbax SB-C18 / Eclipse Plus C18 (150 × 4.6 mm, 3.5/5 µm)
Fasa Bergerak / PelarutPelarut Kromatografi (A: Akueus/Buffer, B: Acetonitrile/Methanol)
Kadar Alir & Suhu0.1 – 2.0 mL/min (Purge: 5.0 mL/min) @ 25 – 60 °C (Oven)
Pengesan / Gelombang / SIM190 – 400 nm (DAD full spectral acquisition)
Kriteria Kesesuaian Sistem (SST)Deaerasi injap purge manual, baseline drift < 0.5 mAU/hr, pressure ripple < 2.0%.
Panduan Khas Pengendalian & Penyelenggaraan Terperinci (Pro Tips):
💡 Petua & Perhatian Penting Makmal (Bench Notes):
Analyst Benchtop Checklist Progress
0 / 56 Langkah Selesai (0%)
NPRA
PUSAT KAWALAN KUALITI
ARAHAN KERJA: RRLC HP1200
No. Dokumen: PKKK/300/UP/003 Terbitan / Semakan: Terbitan 3 Semakan 0
Tarikh Kuatkuasa: 10 April 2026 Bahagian / Unit: SPPK · Unit Penyaringan
📋

0.0 SEJARAH PINDAAN & SEMAKAN

📋 Sejarah Pindaan & Semakan Dokumen (3 entri)

Terbitan 1, Semakan 1:

Meminda perkataan Agensi kepada Bahagian di dalam Peranggan Pindaan

Terbitan 2, Semakan 0:

📋 Sejarah Pindaan & Semakan Dokumen (1 entri)

Batal perkataan Unit Penyaringan Tradisional dan Suplemen Kesihatan dalam ruangan TUJUAN dan SKOP

📋 Sejarah Pindaan & Semakan Dokumen (1 entri)

Terbitan 2, Semakan 1:

📋 Sejarah Pindaan & Semakan Dokumen (22 entri)

Terbitan 2, Semakan 2:

Mengemaskini perenggan 5.3, penolong pegawai farmasi ditukar daripada U36 / U32 kepada U7 / U6.

Terbitan 3, Semakan 0:

i. Pindaan No. Dokumen PKKK/300/UAT/004 kepada PKKK/300/UP/003

ii. Pindaan tarikh kuatkuasa arahan kerja daripada 1 Julai 2025 kepada 10 April 2026

iii. Pindaan Perenggan 6.1.4 daripada Instrument 1 kepada RRLC

iv. Mengemaskini perenggan 6.1.5 dengan menambah Pilih tab Method & Run Control

v. Pindaan perenggan 6.1.10 daripada Baseline kepada Balance

vi. Mengemaskini perenggan 6.1.11 dengan menambah Klik kanan ikon thermostat 🡪

Method

vii. Mengemaskini perenggan 6.1.12 dengan menambah Klik kanan ikon DAD 🡪

Method

viii. Mengemaskini perenggan 6.1.13 dengan menambah Klik kanan ikon binary pump 🡪

Method

ix. Pindaan perenggan 6.1.13 daripada insert kepada add dan append kepada add

x. Mengemaskini perenggan 6.1.15 dengan menambah sampel location, (dropdown

Menu 🡪 klik lokasi vial), Inj/ Loc, Sample type :- pilih dropdown menu, Cal level,

Update RF :- Average dan Update RT :- Average

xi. Pindaan perenggan 6.3.1 daripada Instrument 1 kepada RRLC

xii. Pindaan perenggan 6.5 daripada Instrument 1 kepada RRLC

xiii. Pindaan perenggan 6.5 daripada Switch off HPLC pump and lamp kepada Switch off

LC pump, thermostat and lamp

🔬

6.0 PROSEDUR

(letakkan botol pelarut yang diisi penuh dengan pelarut (fasa gerak) yang dikehendaki mengikut analisis yang di jalankan. Pastikan solvent inlet filter mencecah fasa gerak dan tidak terkena dinding botol pelarut. Semua pelarut MESTI di tapis dengan menggunakan penapis membrane 0.45um sebanyak 2 kali)

(Tunggu sehingga semua gambarajah pada ikon ini menjadi hijau 🡪 keadaan bersedia)

Purging: Buka kepala injap, pusing lawan arah jam (purging)

kadar aliran : 5.00mil/min

pelarut A : 100% (jika menggunakan pam A)

pelarut B,C,D : 0%

(Pastikan kesemua pump melalui proses purging secara bergilir-gilir

(100%) dalam selang masa 3 minit setiap satu. Pastikan tiada gelembung

udara pada pump dan kadar tekanan pada pump status adalah stabil)

kadar aliran : 0.1mil/min

naikkan kadar aliran sedikit demi sedikit sehingga perkadaran yang di inginkan (bergantung pada ujian yang hendak dilakukan)

(Tunggu sehingga 30 minit)

(masukkan suhu yang dikehendaki (bergantung pada analisis yang

dijalankan)

Klik OK

Signal: -masukkan nilai detector (nm) yang dikehendaki

Spectrum :-

Range : 190 to 400 nm

Step : 2.0nm

Klik OK

Jika ingin menggunakan gradient :-

Klik OK

Method Information 🡪 masukkan sebarang komen mengenai analisis yang di lakukan secara ringkas

Klik OK

Untuk jalankan analisis secara SEQUENCE :-

Operator name :-

Data file :- masukkan nama file pada subdirectory

Klik OK

Sampel location :- lokasi vial (dropdown menu 🡪 klik

lokasi vial)

Sample name :-

Method name :-

Inj/ Loc :- bilangan injection untuk satu vial

Sample type :- pilih dropdown menu

Cal level :-

Update RF :- Average

Update RT :- Average

Klik OK

🡪masukkan nama fail

Klik OK

*pastikan anda tidak menindih (replace) master method yang sedia ada.

Untuk mengubah data / peak yang diperolehi dalam laporan: data in report:-

Slope sensitivity : set value

Height reject : set value

Area reject : set value

Save changed events tables ? 🡪 Yes

Untuk melihat analisis yang telah di jalankan:

OK

(klik pada mana-mana bahagian peak yang di kehendaki, imej spectra

untuk nilai peak tersebut akan tertera)

Bagi proses overlay standard dan sample

Klik OK

Untuk menghasilkan pertindihan (overlay) spectra antara sampel dengan

standard :-

Maka imej spectra standard akan bertindih dengan spectra sampel

Untuk print atau edit spectra, pilih ikon pada graphic toolbar di tepi

Untuk print laporan, klik ‘Report’ [Toolbar] 🡪 print

Setelah selesai ujikaji, pastikan sistem terutamanya column di bersihkan dengan sebaiknya bagi mengelak column tersumbat. Antara langkah-langkah yang perlu di lakukan adalah :-

Kemudian cuci sistem dengan 100% Acetonitrile atau Methanol (bergantung pada column) yang telah di tapis dengan membrane 0.45um selama 30 minit dengan kadar aliran 1.0mil/min untuk penyimpanan kolum.

Setelah selesai analisis, pencucian sistem, padamkan sistem HPLC seperti berikut:-

Switch off LC pump, thermostat and lamp 🡪 Yes

🎯

1.0 TUJUAN

Untuk memastikan langkah-langkah yang terlibat dalam proses pengendalian alat Rapid Resolution Liquid Chromatography HP1200 semasa pengujian sampel dijalankan dengan cekap dan selamat.

📐

2.0 SKOP

📖

3.0 DEFINISI

RRLC - Rapid Resolution Liquid Chromatography

🔀

4.0 CARTA ALIRAN

Tiada carta aliran untuk prosedur ini.

👥

5.0 TANGGUNGJAWAB

Ketua Unit / Pegawai Farmasi Bertanggungjawab

Memastikan prosedur ini diikuti semasa pengendalian alat ini.

Pegawai Farmasi

Menyelia proses pengendalian alat ini oleh Penolong Pegawai Farmasi.

Mengendalikan alat ini mengikut prosedur yang telah ditetapkan.

Memastikan penyelenggaraan alat ini dijalankan pada waktu yang ditetapkan dan menyimpan rekod penyelenggaraan alat.

Mengendalikan alat ini mengikut prosedur yang telah ditetapkan.

📝

7. REKOD KUALITI

Rekod penyelenggaraan alat Rapid Resolution Liquid Chromatography HP1200.

📊

Jadual Kromatografi & Rujukan Data

SEJARAH SEMAKAN PKKK/300/UP/003
TerbitanSemakanDitulis OlehDisemak OlehDiluluskan OlehTarikh Kuatkuasa
10Nurul Izzah Hany IsmailBavahrni a/p SubramaniamWan Nurul Aina Mior Abdullah15 Nov 2016
11Nur Aziah Mohd RasaliOoi Suat HongWan Nurul Aina Mior Abdullah15 Dis 2020
20Nur Aziah Mohd RasaliOoi Suat HongWan Nurul Aina Mior Abdullah1 Jan 2023
21Joanne Ong Yen NeeOoi Suat HongNur Aziah Mohd Rasali1 April 2024
22Tan Lu YiOoi Suat HongIda Syazrina Ibrahim1 Julai 2025
30Nurfatihah OmarTan Lu YiIda Syazrina Ibrahim10 April 2026
JADUAL 2 PKKK/300/UP/003
RUJUKANRUJUKAN
No. DokumenTajuk
Understanding Your Chemstation (Agilent Chemstation)
JADUAL 3 PKKK/300/UP/003
Time%BFlow
000.5
5.0800.5
10.01000.5