Domperidone HPLC Guide
Comprehensive analytical procedure for qualitative identification of adulterant Domperidone (antiemetic/prokinetic agent) in traditional medicines, slimming herbs, and digestive health supplements.
1.0 Objektif & Skop Pengujian
1.0 Tujuan: Untuk menyediakan tatacara operasi standard bagi pengesanan bahan campur palsu Domperidone dalam produk tradisional dan suplemen kesihatan secara kromatografi cecair berprestasi tinggi (HPLC-PDA).
2.0 Skop: Digunapakai untuk sampel pengawasan pasaran, aduan pengguna, pendaftaran produk, dan sampel tindakan undang-undang farmasi di Seksyen Pengujian Produk & Kosmetik.
2.0 Radas, Reagen & Penyediaan Larutan Piawai
• Penyediaan Fasa Bergerak (Mobile Phase A):
Timbang 2.72 g Potassium Dihydrogen Phosphate (KH₂PO₄) ke dalam bikar dan larutkan dalam 1000 mL Ultrapure Water (18.2 MΩ). Laraskan pH kepada pH 3.0 ± 0.05 menggunakan asid ortofosforik (H₃PO₄) 85%. Turas menggunakan penuras membran nilon 0.45 µm dan degas selama sekurang-kurangnya 20 minit.
• Fasa Bergerak B: Acetonitrile (HPLC Grade), didegas 20 minit.
• Larutan Stok Piawai Domperidone (1.0 mg/mL):
Timbang tepat 10.0 mg Domperidone RS ke dalam kelalang volumetrik 10 mL. Larutkan dan genapkan dengan Methanol (HPLC Grade).
• Larutan Piawai Bekerja (0.05 mg/mL):
Pipet 0.5 mL daripada larutan stok ke dalam kelalang volumetrik 10 mL dan genapkan dengan Methanol.
• Larutan Had Pengesanan (LOD Solution, 0.003 mg/mL):
Pipet 0.6 mL larutan piawai bekerja ke dalam kelalang volumetrik 10 mL dan genapkan dengan Methanol.
3.0 Tatacara Pengekstrakan Sampel Matriks
- Bentuk Pepejal (Tablet / Kapsul / Serbuk): Timbang tepat 1.0 g sampel (atau sukat 1.0 mL bagi sediaan cecair) ke dalam tiub emparan 50 mL.
- Penambahan Pelarut: Tambah 20.0 mL Methanol. (Gunakan 20.0 mL Chloroform bagi sediaan softgel kapsul).
- Sonikasi: Sonikasi dalam kukus ultrasonik selama 15 minit.
- Pengemparan: Empar pada kelajuan 3000 rpm selama 10 minit.
- Penurasan: Turas cecair atas menggunakan penuras picagari 0.45 µm (Nylon/PTFE) ke dalam vial HPLC.
4.0 Program Gradien & Turutan Suntikan
| Masa (min) | Buffer 20 mM KH₂PO₄ pH 3.0 (%) | Acetonitrile (%) | Kadar Alir (mL/min) |
|---|---|---|---|
| 0.01 – 1.99 | 90 % | 10 % | 1.0 mL/min |
| 2.00 – 3.99 | 70 % | 30 % | 1.0 mL/min |
| 4.00 – 7.99 | 50 % | 50 % | 1.0 mL/min |
| 8.00 – 11.99 | 40 % | 60 % | 1.0 mL/min |
| 12.00 – 14.09 | 30 % | 70 % | 1.0 mL/min |
| 14.10 – 20.00 | 90 % | 10 % (Re-equilibration) | 1.0 mL/min |
1. Blank ➔ 2–7. Domperidone RS (6x SST) ➔ 8. LOD Solution ➔ 9. Blank ➔ 10–11. Sampel 1 (Inj A & B) ➔ 12. Blank ➔ 13–18. Sampel 2 hingga 5 ➔ 19. LOD Solution (IQC) ➔ Akhir. LOD Solution.
5.0 Kriteria Kesesuaian Sistem & Interpretasi Keputusan
- %RSD Waktu Penahanan: ≤ 2.0% bagi 6 suntikan piawai.
- Tailing Factor (T): T ≤ 2.0.
- Plat Teori (N): N ≥ 2000.
- IQC Drift: Perbezaan waktu penahanan LOD ≤ 3.0%.
- Waktu Penahanan: Puncak kromatogram sampel bersamaan dengan piawai Domperidone dalam julat ± 2%.
- Spektrum UV: Spektrum UV PDA (190–400 nm, $λ_max = 284nm$) sepadan dengan indeks persamaan > 0.999.
- Sensitiviti: Puncak sampel ≥ keluasan puncak larutan LOD (0.003mg/mL).
Sekiranya sampel disyaki POSITIF Domperidone, pengekstrakan baharu hendaklah dijalankan oleh Penganalisis Kedua pada tarikh berbeza dan disahkan melalui analisis GCMS (`PKKK/300/UP/004` / `PKKK/300/UP/017`).