Hydroquinone in Cosmetics HPLC Guide
Official ISO/IEC 17025 accredited screening procedure for the detection of banned skin-whitening agent Hydroquinone in cosmetic creams, lotions, and dermatological preparations using HPLC-PDA.
1.0 Objektif & Skop Pengujian
1.0 Objektif: Untuk mengenal pasti kehadiran bahan racun berjadual Hydroquinone dalam produk krim kosmetik secara kromatografi cecair berprestasi tinggi (HPLC-PDA).
2.0 Skop: Kaedah penyaringan ini digunapakai untuk identifikasi Hydroquinone dalam produk kosmetik krim yang diterima daripada Seksyen Survelan & Aduan, Cawangan Penguatkuasaan Farmasi, dan pihak berkepentingan.
2.0 Radas, Reagen & Penyediaan Larutan Piawai
• Penyediaan Pelarut Penimbal 0.05 M Phosphate Buffer pH 2.5 (Diluent):
Timbang 13.685 g Potassium Dihydrogen Phosphate (KH₂PO₄) ke dalam bikar 500 mL dan larutkan dengan 300 mL air suling ultrapure. Pindahkan ke dalam bikar 2 L dan genapkan dengan air sehingga tanda 2000 mL. Laraskan nilai pH kepada pH 2.5 ± 0.05 menggunakan asid ortofosforik (H₃PO₄) 85%. Turas (0.45 µm) dan degas 20 minit.
• Fasa Bergerak (Mobile Phase):
Campurkan 99% 0.05 M Phosphate Buffer Solution pH 2.5 dan 1% Methanol (HPLC grade) secara isokratik.
• Larutan Stok Piawai Hydroquinone (0.05 mg/mL):
Timbang lebih kurang 2.5 mg Hydroquinone RS ke dalam kelalang volumetrik 50 mL dan genapkan dengan diluent buffer pH 2.5. Sonikasi sehingga larut sepenuhnya.
• Larutan Piawai Bekerja (0.025 mg/mL):
Pipet 10.0 mL larutan stok ke dalam kelalang volumetrik 20 mL dan genapkan dengan diluent buffer. Turas sebelum disuntik.
• Larutan Had Pengesanan (LOD Solution, 0.0005 mg/mL / 0.002% w/w):
Pipet 200 µL larutan stok Hydroquinone ke dalam kelalang 20 mL mengandungi 0.5 g sampel blank (matriks krim kosong tanpa hydroquinone), genapkan dengan 20 mL diluent, dan sonikasi selama 30 minit.
3.0 Penyediaan Sampel Krim Kosmetik (Para 6.4.2)
- Timbang tepat kira-kira 0.5 g sampel krim ke dalam kelalang Erlenmeyer 50 mL bertutup.
- Sukat 20.0 mL diluent (Phosphate Buffer pH 2.5) menggunakan silinder penyukat dan masukkan ke dalam kelalang.
- Tutup kelalang dan letakkan di dalam kukus ultrasonik. Sonikasi selama 30 minit bagi mengekstrak keluar hydroquinone daripada emulsi krim.
- Turas larutan menggunakan penuras membran nilon 0.45 µm sebelum disuntik ke dalam HPLC.
4.0 Parameter Kromatografi & Turutan Suntikan
1. Blank / Diluent ➔ 2. Larutan LOD (0.0005 mg/mL) ➔ 3. Piawai Bekerja Hydroquinone (SST) ➔ 4. Larutan LOD ➔ 5–7. Sampel Kosmetik 1 hingga 3 ➔ 8. Larutan LOD (IQC Bracket) ➔ 9–13. Sampel 4 hingga 8 ➔ Akhir. Larutan LOD.
5.0 Kriteria SST, Interpretasi Keputusan & Rekod Kualiti
- Faktor Pengekoran (Tailing Factor): T ≤ 2.0.
- Plat Teori (N): N ≥ 1500.
- IQC Drift (% Perbezaan RT LOD): Tidak melebihi (NMT) 3.0% bagi setiap kelompok 5 sampel.
- Waktu Penahanan (RT): Sepadan dengan piawai Hydroquinone.
- Keluasan Puncak: Melebihi keluasan puncak larutan LOD ($0.002% w/w$).
- Spektrum UV: Sepadan dengan spektrum piawai Hydroquinone ($λ_max = 280nm$).
- Ketulenan Puncak (Peak Purity): Indeks ketulenan puncak menghampiri 1.0.