🇲🇾 NPRA — Pusat Kawalan Kualiti · ISO/IEC 17025 Accredited

◈ Seksyen Pengujian Produk & Kosmetik · Unit Penyaringan

PKKK/300/UP/034 EG & DEG dalam Ubat Cecair (GCMS)

Arahan Kerja Rasmi (Level 300 SOP) · Kategori: GC-MS / Kaedah Pengujian Kuantitatif

Prosedur standard ujian identifikasi kualitatif (screening) dan penentuan kuantitatif (assay) Diethylene Glycol (DEG, CAS 111-46-6) dan Ethylene Glycol (EG, CAS 107-21-1) dalam persediaan ubat cecair (sirap, ampaian, larutan) menggunakan Gas Chromatography-Mass Spectrometry (GCMS) dalam mod Selected Ion Monitoring (SIM). Mengikut piawaian USP-NF Propylene Glycol Monograph: USP 43 – NF 38 (Had Ketat NMT 0.10% v/v).

COLUMN BP-20 (Wax) 30m × 0.25mm × 0.25µm

IONIZATION EI 70 eV

INJECTION 1.0 µL Split (20:1) @ 250°C

CARRIER GAS Helium ≥ 99.999% (0.65 mL/min)

SOLVENT DELAY 4.00 min (MeOH cut)

EG QUANT/QUAL m/z 31 (Quant), m/z 33, 62 (Qual)

DEG QUANT/QUAL m/z 45 (Quant), m/z 75, 31 (Qual)

USP LIMIT NMT 0.10% v/v

Piawai & Reagen

Stok 2000 ppm, Seri Kalibrasi Aras 1–5, LOD 2 ppm, LOQ 6 ppm

➔

Penyediaan Sampel

1 mL sampel → 50 mL MeOH → Sonikasi 5 min → 100 mL → Turas 0.45µm

➔

Parameter GCMS

BP-20 Wax, Linear Velocity 30 cm/s, SIM Time Windows

➔

Suntikan Batch

Blank, SST (n=6), LOD, LOQ, Kalibrasi 1–5, Sampel Duplikat A/B, IQC

➔

Kuantitasi & Had

Linearity R² ≥ 0.9950, Ion Ratio Tolerance, Equation 1 (% v/v)

🔬 Instrumen & Radas Yang Digunakan Dalam Kaedah PKKK/300/UP/034:

PKKK/300/UP/040

GCMS Shimadzu QP2010 Ultra (COAST SIM Mode)

Buka SOP Alat →

PKKK/300/UP/017

GCMS Agilent 8890 / 5977B (MassHunter SIM)

GCMS Agilent 7890A / 5975C (ChemStation)

Buka SOP Alat →

PKKK/300/UP/005

Alat Timbang Precisa XT 120A

Buka SOP Alat →

PKKK/300/UP/058

Ultrasonic Bath Branson 8210 (Sonikasi 5 minit)

Buka SOP Alat →

Analyst Benchtop Checklist Progress

0 / 6 Modul Selesai (0%)

NPRA PUSAT KAWALAN KUALITI	ARAHAN KERJA: IDENTIFIKASI DAN KANDUNGAN DIETHYLENE GLYCOL DAN ETHYLENE GLYCOL DALAM UBAT CECAIR MENGGUNAKAN GCMS
	No. Dokumen: PKKK/300/UP/034	Terbitan / Semakan: Terbitan 1 Semakan 2
	Tarikh Kuatkuasa: 1 Julai 2026	Bahagian / Unit: SPPK · Unit Penyaringan

📋 Sejarah Pindaan 1.0 Tujuan 2.0 Skop 3.0 Definisi 5.0 Tanggungjawab 6.1 Bahan & Reagen 6.2 Penyediaan Piawai 6.3 Penyediaan Sampel 6.4 Parameter GCMS & SIM 6.4.2 Turutan Suntikan 6.4.3 Kriteria SST & QC 6.4.6 Interpretasi & Formula 🧮 Kalkulator % v/v 7.0 Rekod Kualiti 📚 Rujukan

📋

0.0 SEJARAH PINDAAN & SEMAKAN (REVISION HISTORY)

SEJARAH SEMAKAN DOKUMEN PKKK/300/UP/034

Terbitan	Semakan	Ditulis oleh	Disemak oleh	Diluluskan oleh	Tarikh Kuatkuasa
1	0	Tan Lu Yi	Ooi Suat Hong	Ida Syazrina Ibrahim	1 Julai 2025
1	1	Tan Lu Yi	Nurul ‘Izzah Hany Ismail	Ida Syazrina Ibrahim	10 April 2026
1	2	Tan Lu Yi	Nurul ‘Izzah Hany Ismail	Ida Syazrina Ibrahim	1 Julai 2026

📝 Ringkasan Pindaan Dokumen Rasmi:

Terbitan 1, Semakan 1 (10 April 2026):
- Pindaan No. Dokumen daripada PKKK/300/UAT/060 kepada PKKK/300/UP/034.
- Pindaan tarikh kuatkuasa arahan kerja daripada 1 Julai 2025 kepada 10 April 2026.
- Mengemaskini No. Dokumen di Rujukan & para 6.3.1 (PKKK/300/UP/001).
- Kemaskini Table 2 (GCMS System): Penambahan dimensi kolum BP-20 30 m × 0.25 mm × 0.25 µm.
- Kemaskini Table 7 (Limits/Specifications): Menggantikan unit "%" kepada "% v/v".
- Kemaskini Table 4 (SIM Mode): Penambahan catatan pelarasan tetingkap masa pemerolehan data (data acquisition time windows).
Terbitan 1, Semakan 2 (1 Julai 2026 - Terkini):
- Pindaan tarikh kuatkuasa arahan kerja kepada 1 Julai 2026.
- Pembetulan No. CAS: Diethylene Glycol (CAS: 111-46-6) & Ethylene Glycol (CAS: 107-21-1).
- Penambahan subseksyen 6.2.6 Qualitative Screening Test (Identification).
- Kemaskini para 6.3.3 Sample Dilution ("for quantitative assay purposes only").
- Kemaskini 6.4.2 Sequence of Injection: Penambahan turutan suntikan untuk Sample 3 sehingga Sample 6 dan nota kalibrasi tidak diperlukan untuk screening kualitatif.
- Kemaskini para 6.4.6A (iii): Garis panduan terperinci untuk keputusan duplikat sampel yang bercanggah (Discordant Replicate Analyses: Borderline LOD & Borderline LOQ).
- Kemaskini Rekod Kualiti: Penambahan Borang UP/001A (Borang Persampelan) & UP/009 (Laporan Pengujian Identifikasi dan Kandungan DEG dan EG Menggunakan GCMS).

🎯

1.0 TUJUAN (PURPOSE)

1.1 Untuk memastikan ujian identifikasi dan penentuan kandungan Diethylene Glycol (DEG) dan Ethylene Glycol (EG) dalam persediaan ubat cecair menggunakan Gas Chromatography-Mass Spectrometer (GCMS) dilaksanakan dengan cekap, tepat, berkesan dan mematuhi keperluan ISO/IEC 17025.

📐

2.0 SKOP (SCOPE)

2.1 Prosedur ini hendaklah digunakan untuk menjalankan ujian identifikasi kualitatif (screening) dan penentuan kuantitatif (assay) Diethylene Glycol dan Ethylene Glycol dalam semua bentuk produk ubat cecair (sirap, ampaian/suspension, titisan/drops dan larutan oral) menggunakan instrumen Gas Chromatography-Mass Spectrometer (GCMS).

📖

3.0 DEFINISI & SINGKATAN (DEFINITIONS)

GCMSGas Chromatography Mass Spectrometer GCGas Chromatography MSMass Spectrometer DEGDiethylene Glycol (CAS No.: 111-46-6, Ketumpatan: 1.118 g/mL) EGEthylene Glycol (CAS No.: 107-21-1, Ketumpatan: 1.113 g/mL) SIMSelected Ion Monitoring — mod pengimbasan MS terpilih untuk sasaran ion tertentu RSReference Standard (Piawai Rujukan) ISInternal Standard (Piawai Dalaman) EIElectron Ionization (Pengionan Elektron pada 70 eV) OOSOut of Specification (Luar Spesifikasi) SSTSystem Suitability Test (Ujian Kesesuaian Sistem, n=6 suntikan Aras 3) NMT / NLTNot More Than (Tidak Melebihi) / Not Less Than (Tidak Kurang Daripada) UPAUnit Perkhidmatan Analisis LODLimit of Detection (Had Pengesanan: EG 2.00 µg/mL, DEG 2.01 µg/mL / 0.02% v/v) LOQLimit of Quantitation (Had Kuantitasi: EG 6.01 µg/mL, DEG 6.04 µg/mL / 0.06% v/v) RSDRelative Standard Deviation (Sisihan Piawai Relatif, % RSD) IQCInternal Quality Control (Kawalan Kualiti Dalaman — suntikan LOD setiap 5 sampel) ppmparts per million (µg/mL) TfTailing factor (Faktor Pengekoran Puncak) NTheoretical Plate (Plat Teori Resolusi Kolum) R²Correlation coefficient (Pekali Korelasi Regresi Linear Kalibrasi ≥ 0.9950) S/NSignal-to-Noise Ratio (Nisbah Isyarat kepada Hingar) m/zmass-to-charge ratio (Nisbah Jisim kepada Cas) % v/vpercent volume over volume (Peratus Isipadu per Isipadu) USP / NFUnited States Pharmacopeia / National Formulary

🔀

4.0 CARTA ALIRAN (FLOWCHART)

Tiada carta aliran khusus untuk prosedur ini — Sila rujuk visual workflow timeline di bahagian atas halaman ini.

👥

5.0 TANGGUNGJAWAB (RESPONSIBILITIES)

MATRIKS TANGGUNGJAWAB OPERASI Seksyen 5.0

No.	Jawatan	Tanggungjawab Khusus
5.1	Ketua Seksyen	Memastikan prosedur ini dipatuhi sepenuhnya semasa pengujian dijalankan. Menyemak dan mengesahkan semua laporan ujian tidak lulus yang telah disemak oleh Pegawai Farmasi termasuk laporan OOS.
5.2	Ketua Unit / Pegawai Farmasi Bertanggungjawab	Mengagih sampel kepada Pegawai Farmasi. Memastikan prosedur ini dipatuhi semasa pengujian dijalankan. Menyemak dan mengesahkan semua laporan ujian yang telah disemak oleh Pegawai Farmasi termasuk laporan OOS.
5.3	Pegawai Farmasi	Mengagihkan sampel kepada Pegawai Farmasi dan Penolong Pegawai Farmasi. Menyelia ujian yang dijalankan. Menyemak laporan ujian. Menjalankan siasatan OOS dan menyediakan laporan OOS bagi sampel gagal ujian. Menjalankan aktiviti pengujian sampel mengikut tatacara.
5.4	Penolong Pegawai Farmasi U7 / U6	Mengambil dan merekodkan penerimaan sampel dari Unit Perkhidmatan Analisis (UPA). Merekodkan bilangan ujian selepas laporan ujian disiapkan untuk laporan bulanan. Menghantar laporan ujian ke UPA untuk simpanan arkib.
5.5	Penolong Pegawai Farmasi	Menjalankan aktiviti pengujian sampel mengikut tatacara yang telah ditetapkan. Menyediakan laporan ujian dan mengintegrasikan kromatogram.

🔬

6.0 PROSEDUR PENGENDALIAN TERPERINCI (STEP-BY-STEP)

6.1 Bahan, Reagen, Piawai Rujukan & Radas (Materials & Equipment)

🧪 Senarai Instrumen, Kimia & Piawai Rujukan:

Instrumen GCMS: Gas Chromatography Mass Spectrometer Shimadzu QP2010 Ultra / Agilent 8890/5977B / Agilent 7890A/5975C.
Kolum Kromatografi: BP-20 (Wax), dimensi 30 m × 0.25 mm × 0.25 µm atau setaraf (polyethylene glycol stationary phase).
Alat Timbang: Analytical balance (ketepatan 0.1 mg) & Microbalance (ketepatan 0.01 mg).
Radas Sokongan: Vortex Mixer Genie 2, Ultrasonic Bath Branson 8210.
Piawai Rujukan (Reference Standard): Primary / Secondary RS atau setaraf:

▸ Diethylene Glycol (DEG): CAS No. 111-46-6, Ketumpatan (ρ): 1.118 g/mL

▸ Ethylene Glycol (EG): CAS No. 107-21-1, Ketumpatan (ρ): 1.113 g/mL
Bahan Kimia & Pelarut: Methanol (Kualiti GC / HPLC Grade ≥ 99.9%), Gas Helium (Ketulenan Tinggi ≥ 99.999%).
Barangan Guna Habis (Consumables): Kelalang volumetrik Gred A (5 mL, 10 mL, 100 mL), Pipet automatik kalibrasi (10–100 µL, 100–1000 µL), Penuras Picagari Nylon 0.45 µm (Nylon syringe filter), Vial kromatografi amber skru 2 mL dengan sisipan (insert).

6.2 Penyediaan Larutan Piawai Rujukan (Reference Standard Preparation)

6.2.1 Larutan Stok Piawai Tunggal (Individual Standard Stock Solution — 2000 µg/mL / 2000 ppm):

Timbang tepat kira-kira 20 mg piawai rujukan Diethylene Glycol (DEG) dan Ethylene Glycol (EG) ke dalam kelalang volumetrik 10 mL yang berasingan.
Larutkan dan cukupkan isipadu sehingga tanda senggatan dengan Methanol.
Kepekatan akhir setiap larutan stok individu ialah 2.0 mg/mL (2000 µg/mL atau 2000 ppm).

6.2.2 Larutan Stok Piawai Campuran (Mixed Standard Stock Solution — 200 µg/mL / 200 ppm):

Pipet tepat 1.0 mL daripada setiap larutan stok tunggal DEG dan EG ke dalam kelalang volumetrik 10 mL yang sama.
Cukupkan isipadu dengan Methanol sehingga tanda senggatan dan campurkan sehingga sebati.
Kepekatan larutan stok campuran ialah 0.2 mg/mL (200 µg/mL atau 200 ppm) bagi setiap sebatian.

6.2.3 Larutan Piawai Kerja Keluk Kalibrasi (Calibration Curve Working Standard Solutions — Aras 1 hingga 5):

Sediakan siri larutan piawai kerja keluk kalibrasi ke dalam 5 kelalang volumetrik 5 mL yang berasingan seperti jadual di bawah:

JADUAL 1: PENYEDIAAN LARUTAN PIAWAI KERJA KALIBRASI (LEVEL 1 – 5) Seksyen 6.2.2 (Table 1)

Aras (Level)	Isipadu Stok Campuran (µL)	Isipadu Akhir dalam Methanol (mL)	Kepekatan EG (µg/mL / ppm)	Kepekatan DEG (µg/mL / ppm)	Fungsi Khusus
Level 1	135 µL	5 mL	6.01	6.04	Had Kuantitasi (LOQ)
Level 2	180 µL	5 mL	8.01	8.05	Titik Kalibrasi Aras 2
Level 3	225 µL	5 mL	10.02	10.06	System Suitability (SST)
Level 4	270 µL	5 mL	12.02	12.07	Titik Kalibrasi Aras 4
Level 5	315 µL	5 mL	14.02	14.09	Aras Tertinggi Kalibrasi

🧪 6.2.4 Larutan Ujian Kesesuaian Sistem (System Suitability Solution — SST):

Gunakan larutan Level 3 (10 µg/mL bagi setiap sebatian) sebagai larutan System Suitability (disuntik sebanyak 6 kali replikasi pada awal setiap turutan batch).

🎯 6.2.5 Larutan Had Pengesanan (Limit of Detection Solution — LOD: ~2 µg/mL / 2 ppm):

Pipet tepat 45 µL larutan stok piawai campuran (200 ppm) ke dalam kelalang volumetrik 5 mL. Cukupkan isipadu dengan Methanol dan vortex selama 30 saat. Kepekatan akhir: EG 2.00 µg/mL, DEG 2.01 µg/mL (bersamaan 0.02% v/v dalam sampel).

💡 6.2.6 Ujian Saringan Kualitatif Sahaja (Qualitative Screening Test / Identification):

Bagi ujian saringan kualitatif (pengenalpastian sahaja tanpa kuantitasi assay), hanya sediakan larutan LOD (2 µg/mL), Level 1 / LOQ (6 µg/mL), dan Level 3 / SST (10 µg/mL). Siri keluk kalibrasi penuh (Level 1–5) tidak perlu disediakan.

6.3 Penyediaan Sampel Ubat Cecair (Sample Preparation — Duplicate Replicates A & B)

⚠️ PANDUAN PENGENDALIAN SAMPEL (SAMPLING):

Proses persampelan dijalankan mengikut dokumen rasmi PKKK/300/UP/001. Goncang botol ubat cecair dengan perlahan-lahan untuk memastikan sampel homogen sebelum dipipet. Semua sampel wajib disediakan secara DUPLIKAT (Replicate A dan Replicate B).

Goncang botol sampel secara perlahan untuk menghomogenkan larutan ubat cecair/sirap/ampaian.
Pipet tepat 1.0 mL sampel dan masukkan ke dalam kelalang volumetrik 100 mL (sediakan 2 kelalang berasingan: Replicate A dan Replicate B).
Tambahkan kira-kira 50 mL Methanol ke dalam kelalang volumetrik tersebut.
Sonikasi larutan dalam kukus ultrasonik (Ultrasonic Bath Branson 8210) selama 5 minit untuk melarutkan matriks sirap sepenuhnya.
Biarkan larutan menyejuk sehingga mencapai suhu bilik (room temperature).
Cukupkan isipadu kelalang volumetrik sehingga tanda senggatan 100 mL dengan Methanol dan goncang sehingga sebati.
Turas larutan sampel menggunakan penuras picagari nilon 0.45 µm (0.45 µm nylon syringe filter) terus ke dalam vial amber 2 mL GCMS.

💧 6.3.3 Pencairan Sampel (Sample Dilution — Kuantitatif Sahaja):

Sekiranya kepekatan analit dalam sampel melebihi julat linear keluk kalibrasi (> 14 µg/mL), lakukan pencairan yang bersesuaian dengan Methanol (contohnya 1:5 atau 1:10). Rekodkan faktor pencairan (Dilution Factor, DF) secara terperinci dalam lembaran kerja rasmi untuk pengiraan akhir.

6.4 Kaedah Eksperimen, Parameter GCMS & Mod SIM (Selected Ion Monitoring)

JADUAL 2: PARAMETER INSTRUMEN GC & MS Table 2

Parameter	Tetapan Operasi Rasmi (Standard Operating Condition)
A. PARAMETER GAS CHROMATOGRAPHY (GC)
Kolum Kromatografi	BP20 (Wax), Dimensi: 30 m × 0.25 mm × 0.25 µm
Program Suhu Oven	Rujuk Jadual 3 (Program Suhu Oven di bawah)
Mod Kawalan Aliran	Linear Velocity (30.0 cm/sec)
Kadar Aliran Turus (Flow Rate)	0.65 mL/min
Gas Pembawa (Carrier Gas)	Helium (Ketulenan: ≥ 99.999%)
Mod Suntikan (Injection Mode)	Split (Split Ratio 20:1)
Suhu Penyuntik (Injector Temp)	250 °C
Isipadu Suntikan (Injection Volume)	1.0 µL
B. PARAMETER MASS SPECTROMETRY (MS)
Suhu Antaramuka (Interface Temp)	240 °C
Suhu Sumber Ion EI (Ion Source Temp)	230 °C
Tenaga Pengionan EI (Ionization Energy)	70 eV
Solvent Delay (Methanol Cut)	0.00 hingga 4.00 minit (Scan OFF untuk melindungi filamen MS)
Julat Imbasan (Full Scan Range)	m/z 25 hingga m/z 200
Mod Pemerolehan Utama	SIM (Selected Ion Monitoring) — Rujuk Jadual 4

JADUAL 3: PROGRAM SUHU OVEN KROMATOGRAFI Table 3

Peringkat Oven Ramp	Kadar Kenaikan (°C/min)	Suhu Sasaran (°C)	Masa Tahanan (Hold Time, min)	Masa Kumulatif (Run Time, min)
Initial	—	100 °C	1.00 min	1.00 min
Ramp 1	10.0 °C/min	130 °C	7.00 min	11.00 min
Ramp 2	20.0 °C/min	240 °C	3.00 min	19.50 min
Post Run	20.0 °C/min	250 °C	3.00 min	23.00 min

JADUAL 4: TETAPAN MOD SIM (SELECTED ION MONITORING) Table 4

Sebatian Sasaran	Tetingkap Masa (Acquisition Window)	Ion Sasaran & Rujukan (SIM Ions)	Fungsi Pengenalpastian (ID)	Waktu Penahanan Tipikal (RT)
Ethylene Glycol (EG) CAS: 107-21-1 · MW: 62.07	4.50 – 11.00 minit	Target Ion: m/z 31 (Base Peak)	Kuantitasi (Quantitation)	7.00 – 7.50 min
Ethylene Glycol (EG) CAS: 107-21-1 · MW: 62.07	4.50 – 11.00 minit	Reference 1: m/z 33 Reference 2: m/z 62 (Molecular Ion)	Kualifikasi (Qualification)	7.00 – 7.50 min
Diethylene Glycol (DEG) CAS: 111-46-6 · MW: 106.12	11.00 – 20.00 minit	Target Ion: m/z 45 (Base Peak)	Kuantitasi (Quantitation)	14.00 – 14.50 min
Diethylene Glycol (DEG) CAS: 111-46-6 · MW: 106.12	11.00 – 20.00 minit	Reference 1: m/z 75 Reference 2: m/z 31	Kualifikasi (Qualification)	14.00 – 14.50 min

(*) Catatan: Tetingkap masa pemerolehan data (data acquisition time windows) boleh diselaraskan mengikut RT sebenar analit sasaran bagi memastikan penangkapan puncak yang menyeluruh dan kecekapan instrumen yang optimum.

6.4.2 Turutan Suntikan Kelompok (Sequence of Injection Table)

Bagi setiap suntikan, isipadu yang disuntik ialah 1.0 µL. Turutan suntikan rasmi untuk analisis kelompok 1 hingga 6 sampel adalah seperti berikut:

JADUAL 5: TURUTAN SUNTIKAN ANALISIS (SEQUENCE TABLE) Table 4 (Sequence)

No. Turutan	Kandungan Vial (Sample Details)	Bilangan Suntikan	Tujuan / Kategori Kawalan
1	Blank Solution (Methanol)	1	Semakan Kebersihan Sistem & Garisan Dasar
2 – 7	System Suitability Solution (Level 3 — 10 µg/mL)	6	Ujian SST (n=6 Replikasi)
8	LOD Solution (2 µg/mL)	1	Semakan Had Pengesanan (S/N ≥ 3)
9	LOQ Solution (Level 1 — 6 µg/mL)	1	Semakan Had Kuantitasi (S/N ≥ 10)
10 – 13	Calibration Curve Solutions (Level 2 – 5)	1 (setiap aras)	Pembinaan Keluk Kalibrasi Linear (R² ≥ 0.9950)
14	Blank Solution (Methanol)	1	Pencegahan Carry-over sebelum sampel
15	Sampel 1 (Replicate A)	1	Ujian Sampel 1 Duplikat A
16	Sampel 1 (Replicate B)	1	Ujian Sampel 1 Duplikat B
17	Blank Solution (Methanol)	1	Pencucian Saluran & Baseline Check
18	Sampel 2 (Replicate A)	1	Ujian Sampel 2 Duplikat A
19	Sampel 2 (Replicate B)	1	Ujian Sampel 2 Duplikat B
20	Blank Solution (Methanol)	1	Pencucian Saluran
21	Sampel 3 (Replicate A)	1	Ujian Sampel 3 Duplikat A
22	Sampel 3 (Replicate B)	1	Ujian Sampel 3 Duplikat B
23	Blank Solution (Methanol)	1	Pencucian Saluran
24	Sampel 4 (Replicate A)	1	Ujian Sampel 4 Duplikat A
25	Sampel 4 (Replicate B)	1	Ujian Sampel 4 Duplikat B
26	Blank Solution (Methanol)	1	Pencucian Saluran
27	Sampel 5 (Replicate A)	1	Ujian Sampel 5 Duplikat A
28	Sampel 5 (Replicate B)	1	Ujian Sampel 5 Duplikat B
29	Blank Solution (Methanol)	1	Pencucian Saluran
30	LOD Solution (2 µg/mL)	1	IQC Semakan Pertengahan (Setiap 5 Sampel)
31	Blank Solution (Methanol)	1	Pencucian Saluran
32	Sampel 6 (Replicate A)	1	Ujian Sampel 6 Duplikat A
33	Sampel 6 (Replicate B)	1	Ujian Sampel 6 Duplikat B
34	Blank Solution (Methanol)	1	Pencucian Saluran
35	LOD Solution (2 µg/mL)	1	IQC Akhir Turutan (End of Batch Run)

📌 Peraturan Penting Turutan:

1. Selepas setiap 5 sampel disuntik, larutan LOD Solution MESTI disuntik sebelum meneruskan sampel seterusnya.
2. Larutan LOD Solution MESTI disuntik di akhir keseluruhan analisis batch.
3. Bagi ujian saringan kualitatif (screening sahaja), suntikan larutan keluk kalibrasi (Level 2–5) tidak diperlukan dalam turutan.

6.4.3 Kriteria Penerimaan SST, LOD, LOQ, IQC & Keluk Kalibrasi

JADUAL 6: KRITERIA PENERIMAAN KESESUAIAN SISTEM (SST, LOD & LOQ) Table 5

Parameter Pemeriksaan	Kriteria Had Penerimaan (Acceptance Criteria)	Tindakan Jika Gagal
Faktor Pengekoran (Tailing factor, Tf)	NMT 2.5 (≤ 2.5)	Periksa liner penyuntik, potong 10 cm bahagian hadapan kolum
Plat Teori (Theoretical plate, N)	NLT 2000 (≥ 2000)	Bake-out kolum pada 250 °C atau ganti kolum baharu
% RSD Luas Puncak (Peak Area)	NMT 10.0% (≤ 10.0%) untuk 6 suntikan SST Level 3	Periksa kebocoran septum suntikan atau plunger jarum autosampler
Nisbah S/N bagi Larutan LOD (2 µg/mL)	NLT 3 (≥ 3)	Bersihkan sumber ion MS (EI source cleaning)
Nisbah S/N bagi Larutan LOQ (6 µg/mL)	NLT 10 (≥ 10)	Lakukan autotuning semula dan periksa sensitiviti pengesan
Kestabilan RT bagi IQC (LOD Injection)	Perbezaan RT ≤ 3.0% setiap 5 sampel & di akhir batch	Periksa kestabilan aliran gas pembawa Helium dan tekanan alur masuk
Keluk Kalibrasi Linear (Linearity R²)	R² ≥ 0.9950 (5 aras kalibrasi)	Sediakan semula larutan piawai kerja Level 1–5 dan suntik semula

JADUAL 7: HAD TOLERANSI NISBAH INTENSITI ION RUJUKAN (SIM CONFIRMATION) Table 6

Pengesahan identiti sebatian sasaran (EG dan DEG) berasaskan pengesanan Target Ion dan Reference Ions. Had toleransi nisbah intensiti ion rujukan (berbanding base peak) yang dibenarkan adalah:

Intensiti Relatif Ion Rujukan (% daripada Base Peak)	Had Toleransi Yang Dibenarkan (Tolerance %)
> 50 %	± 10 %
20 % – 50 %	± 15 %
10 % – 20 %	± 20 %
< 10 %	± 50 %

6.5 Interpretasi Keputusan, Kaedah Replikasi Bercanggah & Formula Kuantitasi

A. Kriteria Pelaporan Keputusan Identifikasi:

NOT DETECTED (TIDAK DIKESAN): Dilaporkan sebagai NOT DETECTED (< 0.02% v/v) sekiranya luas puncak analit sasaran dalam larutan sampel adalah kurang daripada luas puncak larutan piawai LOD (2 µg/mL).
BELOW QUANTITATION LIMIT (DI BAWAH HAD KUANTITASI): Dilaporkan sebagai BELOW QUANTITATION LIMIT (< 0.06% v/v) sekiranya luas puncak analit sasaran dalam larutan sampel berada pada atau melebihi LOD tetapi kurang daripada luas puncak larutan piawai LOQ (6 µg/mL).
QUANTIFIABLE AMOUNTS (KUANTITATIF): Sekiranya luas puncak analit dalam larutan sampel melebihi luas puncak larutan piawai LOQ (6 µg/mL), kepekatan sebatian MESTI dikira menggunakan persamaan garis regresi kalibrasi dan dilaporkan dalam % v/v.

⚖️ TATACARA KEPUTUSAN DUPLIKAT BERCANGGAH (DISCORDANT REPLICATE RULES):

i) KEPUTUSAN BORDERLINE LOD (Satu Replikasi < LOD, Satu Lagi ≥ LOD):

Gunakan purata aritmetik (arithmetic mean) luas puncak bagi kedua-dua replikasi A dan B.
Jika purata < LOD → laporkan sebagai < LOD 0.02% v/v (Not Detected).
Jika purata ≥ LOD tetapi < LOQ → analit dianggap dikesan tetapi dilaporkan sebagai < LOQ 0.06% v/v. Ujian ulangan tidak diperlukan.

ii) KEPUTUSAN BORDERLINE LOQ (Satu Replikasi < LOQ, Satu Lagi ≥ LOQ):

Ujian ulangan (repeat analysis) MESTI dijalankan menggunakan bahagian ujian sampel yang baru disediakan (freshly prepared test portion) bersama siri keluk kalibrasi yang lengkap untuk mengesahkan sama ada analit wujud pada kepekatan terkuantiti sebelum laporan akhir dikeluarkan.

📐 PERSAMAAN 1: PENGIRAAN KANDUNGAN ETHYLENE GLYCOL & DIETHYLENE GLYCOL (% v/v)

Kandungan Sebatian (% v/v) =

Kepekatan GCMS (µg/mL) × Isipadu Akhir Sampel (100 mL) × Faktor Pencairan (DF)

Ketumpatan Sebatian (g/mL) × 1,000,000 × Isipadu Sampel Diambil (1.0 mL)

× 100%

% v/v =

C_GCMS (µg/mL) × DF

ρ (g/mL) × 100

Di mana:
• C_GCMS = Kepekatan sebatian yang diukur daripada kromatogram GCMS (µg/mL)
• V_final = Isipadu akhir larutan sampel (100 mL)
• V_sample = Isipadu sampel ubat cecair yang dipipet (1.0 mL)
• DF = Faktor Pencairan (Dilution Factor, jika ada; DF = 1 jika tiada pencairan)
• ρ (Ketumpatan Sebatian Piawai):
▸ Ethylene Glycol (EG): ρ = 1.113 g/mL (CAS: 107-21-1)
▸ Diethylene Glycol (DEG): ρ = 1.118 g/mL (CAS: 111-46-6)
• 10⁶ (1,000,000) = Faktor pertukaran unit (µg ke g)

JADUAL 8: HAD KELULUSAN SPESIFIKASI RASMI (USP 43 – NF 38 MONOGRAPH) Table 7 (Limits)

Sebatian Sasaran	Had Kawalan Spesifikasi Rasmi (Restricted Limit)	Status Pematuhan
Ethylene Glycol (EG)	Untuk ubat sirap perubatan: NMT 0.10% v/v (≤ 0.10% v/v)	LULUS jika ≤ 0.10% v/v \| GAGAL / OOS jika > 0.10% v/v
Diethylene Glycol (DEG)	Untuk ubat sirap perubatan: NMT 0.10% v/v (≤ 0.10% v/v)	LULUS jika ≤ 0.10% v/v \| GAGAL / OOS jika > 0.10% v/v

Rujukan: USP-NF Propylene Glycol Monograph: USP 43 – NF 38, year 2020, page 3753. Sebarang sampel yang melebihi 0.10% v/v hendaklah disiasat serta merta mengikut PKKK/300/UP/002.

🧮 Kalkulator Penentuan Kandungan % v/v (Analyst Benchtop Tool)

Pilih Sebatian:

Kepekatan GCMS, C (µg/mL):

Faktor Pencairan (DF):

Isipadu Sampel (mL):

Kandungan: 0.0898% v/v — LULUS (≤ 0.10% v/v)

📝

7.0 REKOD KUALITI & BORANG RASMI (QUALITY RECORDS)

Semua lembaran kerja, kromatogram integrasi, keluk kalibrasi dan laporan pengujian hendaklah difailkan dengan kemas mengikut piawaian ISO/IEC 17025.

SENARAI BORANG REKOD KUALITI Seksyen 7.0

No. Borang / Dokumen	Tajuk Rekod Kualiti	Lokasi Fail Simpanan	Tempoh Simpanan
UP/001A	Borang Persampelan (Ujian Penyaringan)	Fail Sampel Unit Penyaringan	6 Tahun
UP/009	Laporan Pengujian Identifikasi dan Kandungan DEG dan EG Menggunakan GCMS	Unit Perkhidmatan Analisis (UPA) / Arkib	6 Tahun
LOG-GCMS	Buku Log Penggunaan & Penyelenggaraan Instrumen GCMS	Stesen Kerja GCMS	6 Tahun

📚

8.0 RUJUKAN (REFERENCES)

DOKUMEN RUJUKAN RASMI Seksyen 8.0

No. Dokumen	Tajuk Rujukan	Pautan Pantas
PKKK/300/UP/001	Proses Persampelan (Ujian Penyaringan)	Buka SOP →
PKKK/300/UP/040	Pengendalian Gas Chromatography Mass Spectrometer Shimadzu (QP2010 Ultra)	Buka SOP →
PKKK/300/UP/017	Gas Chromatography Mass Spectroscopy Agilent (8890/5977B)	Buka SOP →
PKKK/300/UP/004	Gas Chromatography-Mass Spectroscopy Agilent (7890A/5975C)	Buka SOP →
USP 43 – NF 38	USP-NF Propylene Glycol Monograph: USP 43 – NF 38, year 2020, page 3753	Rujukan Farmakopeia